Оборудование

В интернет-магазине СТАЙЛАБ вы найдете вакуумную установку с манифольдом, которая позволяет выполнять очистку образцов сразу на нескольких иммуноаффинных колонках.

В отличие от твердофазной экстрации и других методов подготовки проб, аффинная хроматография, или «хроматография по сродству», основывается не на физико-химических свойствах выделяемого вещества, а на специфичности его биологических взаимодействий. В частности, иммуноаффинная хроматография использует способность антител избирательно и обратимо связываться со своими антигенами. Однако общим для всех хроматографических методов, в том числе и иммуноаффинной очистки, является разделение компонентов смеси за счет распределения между неподвижной и подвижной фазами.

В качестве неподвижной хроматографической фазы применяется специальный сорбент, который состоит из носителя (матрицы) и лиганда-антитела, соединенных через особый мостик. При этом к сорбенту выдвигаются следующие требования:

1. Сохранение связи лиганда с матрицей как на протяжении всего процесса хроматографии, так в ходе регенерации сорбента.
2. Слабость неспецифических взаимодействий, препятствующая связыванию сопутствующих примесей.
3. Отсутствие пространственных затруднений при соединении лиганда с молекулой-мишенью.

Чаще всего в роли сорбентов выступают макропористые неорганические вещества (кремнезем, стекло) и органические полимеры (полисахариды, полиакриламид и т.п.). Подвижной фазой (элюентом) обычно служат различные жидкие углеводороды с некоторыми добавками. Эти растворители также должны отвечать многим условиям: например, обладать невысокой вязкостью и совместимостью с методами детектирования, быть нетоксичными, инертными и недорогими.

Большое значение придается и оборудованию для иммуноафинной очистки. Она принадлежит к колоночным хроматографическим методам, в противовес плоскостной и капиллярной хроматографии. Это значит, что стационарная фаза используется для заполнения колонки, в то время как разделяемая смесь пропускается через сорбент в потоке элюента. В качестве колонки для иммуноаффинной очистки вполне подходит стандартный патрон для ТФЭ. Загрузка пробы, так же как и при твердофазной экстракции, происходит либо под действием силы тяжести, либо под давлением, в качестве источника которого может выступать шприц, а также вакуумный насос или компрессор. При помощи таких устройств возможно проводить очистку сразу нескольких образцов, для чего необходимо дополнить насос специальным манифольдом.

Манифольд, или вакуумный коллектор, выглядит как держатель на несколько колонок, подсоединяемых к общему насосу. Устройство колоночной платформы манифольда обычно позволяет использовать не только картриджи и пробирки различного объема, но и стандартные лабораторные микропланшеты. Приобрести вакуумную установку с манифольдом для иммуноаффинной хроматографии, твердофазной экстракции, вакуумного фильтрования и других методов очистки вы можете в интернет-магазине СТАЙЛАБ.